日韩精品人妻一区二区中文,五月婷婷综合在线视频,A久久精品国产精品亚洲,亚州中文精品有码视频在线,精品1区2区3区产品乱码,色哟哟免费观看视频入口,婷婷射精AV这里只有精品,2024日产乱码国产,国产精品三级一区二区,艳妇乳肉豪妇荡乳AV

熱門搜索:A549    293T 金黃色葡萄球菌 大腸桿菌 AKK菌
購物車 1 種商品 - 共0元
當(dāng)前位置: 首頁 > 行業(yè)資訊 > 細(xì)胞凍存

細(xì)胞凍存

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時,可進(jìn)行凍存。

2) 在生物安全柜內(nèi),打開培養(yǎng)瓶瓶口,收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基;

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入3ml無菌的 1×PBS 后,水平放置培養(yǎng)瓶,使PBS能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,吸棄 PBS;

4) 向瓶內(nèi)加入消化液1ml,浸潤底面后放入 37℃ CO2 培養(yǎng)箱中孵育 1~2min;

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入

注:如還有部分細(xì)胞未消化下來,可采用分步消化:2ml 含10%FBS 的培養(yǎng)基(這里的培養(yǎng)基可以用DMEM就行或者其他的基礎(chǔ)培養(yǎng)基)中,將懸液吸入15ml 離心管;

① 準(zhǔn)備一個無菌的 15ml 離心管,加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基;

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和(避免吹打);

③ 向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 胰酶繼續(xù)消化 2min 左右,輕拍培養(yǎng)瓶,95%左右細(xì)胞脫落后加入 2ml 含 10%FBS 的完全培養(yǎng)基中和,中和后的細(xì)胞懸液移入①中的離心管內(nèi)。

6) 1000rpm 離心 5min;

7) 離心完成后,棄上清,用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中;

8) 將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中,之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫;

9) 第二天,取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

察雅县| 新密市| 和平县| 泰来县| 宜春市| 蕲春县| 仁化县| 焦作市| 清丰县| 克拉玛依市| 湟源县| 长丰县| 阜阳市| 柳河县| 崇义县| 衡东县| 曲沃县| 偃师市| 大悟县| 怀安县| 漳平市| 天等县| 牟定县| 若羌县| 乃东县| 宜丰县| 井冈山市| 博白县| 普宁市| 溆浦县| 凤冈县| 九寨沟县| 四子王旗| 中江县| 阿图什市| 平罗县| 塘沽区| 区。| 遂宁市| 无锡市| 乐东|